期刊简介

《中华老年心脑血管病杂志》是医药卫生类专业学术期刊。创刊以来始终遵循办刊宗旨,贯彻党和国家的卫生工作及方针政策,结合我国老年人口超过1亿并逐年增加的现状,为促进我国老年医学的发展,吸收借鉴国内外老年心、脑、血管疾病防治研究的最新科技成果,全心全意为老年医疗保健专业服务。 《中华老年心脑血管病杂志》是向国内外公开发行的科技期刊(国内统一刊号:CN11-4468/R,国际标准刊号:ISSN 1009-0126,邮发代号:2-379)。现为月刊,大16开本,72页,用铜板纸印刷,图文并茂。是中国科技论文统计源期刊(中国科技核心期刊),中国医药卫生核心期刊。2004年获得全军医学期刊“优秀学术质量奖”。主要报道国内外老年心脏疾病、脑部疾病、血管系统疾病的临床诊断及治疗等相关内容,包括临床研究、基础研究、影像学、遗传学、流行病学、临床生化检验与药物、手术和介入治疗以及有关预防、康复等。主要栏目:专家论坛、述评、临床研究、基础研究、循证医学荟萃、继续教育园地、保健与康复、综述、讲座、病例报告、论著摘要、读者·作者·编者等。 读者对象为从事老年临床医疗工作的医护人员、科研人员和医疗保健人员。

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  • 杂志名称:中华老年心脑血管病杂志
  • 主管单位:中国人民解放军总医院
  • 主办单位:中国人民解放军总医院
  • 国际刊号:1009-0126
  • 国内刊号:11-4468/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:2004年获全军医学期刊质量评比“优秀质量期刊奖”期刊收录:国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 维普收录(中)
中华老年心脑血管病杂志2011年第03期

大鼠胱抑素C腺病毒高效表达载体的构建在大鼠心肌成纤维细胞中的表达

张书敏;王永梅;杜贻萌;魏峰涛;蒋卫东;王欣;董兆强;姜红;鹿庆华

关键词:腺病毒科, 基因表达, 转染, 肌细胞, 心脏, 成纤维细胞, 半胱氨酸蛋白酶抑制剂, 逆转录聚合酶链反应
摘要:目的 采用GatewayTM技术构建携带胱抑素C(CysC)基因的重组腺病毒载体,并观察在大鼠心肌成纤维细胞中的表达.方法 采用RT-PCR方法从大鼠心肌组织中扩增出CysC基因,将CysC基因经BP重组反应定向克隆至pDONR221载体,获得重组质粒pDONR221-CysC,经PCR及测序验证正确的pDONR221-CysC与腺病毒载体pAd/CMV/V5-DEST在体外进行LR重组反应,CysC取代pAd/CMV/V5-DEST中的ccdB-CmR基因,获得重组腺病毒载体pAd/CMV/V5-DEST-CysC.采用Western blot技术检测CysC蛋白在293A细胞及大鼠心肌成纤维细胞中的表达.将培养的心肌成纤维细胞随机分为实验组、空载体组和对照组.结果CysC腺病毒高效表达载体构建成功,测得病毒滴度为5.36×1010ifu/ml.用重组CysC腺病毒转染心肌成纤维细胞24h后,实验组的转染效率高(≥90%);与对照组和空载体组比较,实验组CysC蛋白表达明显上调(P<0.05).结论 成功构建了大鼠CysC腺病毒高效表达载体,并成功包装了含有该基因的重组腺病毒,可有效转染心肌成纤维细胞.